নৈমিত্তিকের ভূমিকা এবং স্পেকট্রোফোটোমিটারের সাধারণ উপাদানগুলির প্রয়োগ

স্পেকট্রোফোটোমিটার জৈবিক, রাসায়নিক, ক্লিনিকাল এবং পরিবেশগত গবেষণায় ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।
স্পেকট্রোফোটোমিটারি পরিমাপ করে একটি বর্ণালোকের পরিমাপকের একটি নমুনার মাধ্যমে আলোর মরীচি কেটে কোনও রাসায়নিক কত আলোক শোষণ করতে পারে measures
সনাক্ত করা আলোর তীব্রতা পরিমাপ করে, পদ্ধতিটি নমুনায় দ্রাবনের ঘনত্ব নির্ধারণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে।
স্পেকট্রোফোটোমেট্রির ধারণা
নমুনায় প্রেরণ করা বিমে একটি ফোটন মরীচি থাকে।
যখন নমুনায় ফোটনগুলি অণুগুলির সাথে মিলিত হয়, তখন অণুগুলি সেগুলির কয়েকটি শোষণ করতে পারে, মরীচিতে ফোটনের সংখ্যা হ্রাস করতে পারে এবং সনাক্তকরণ সংকেতের তীব্রতা হ্রাস করতে পারে।
ট্রান্সমিট্যান্স নমুনার মধ্য দিয়ে প্রবাহিত আলোর একটি অংশ। এটি ঘটনার আলোর তীব্রতায় নমুনার মধ্য দিয়ে যাওয়া আলোক তীব্রতা হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়।
শোষণটি ট্রান্সমিট্যান্সের বিপরীতে, বর্ণালোকের পরিমাপক দ্বারা পরিমাপ করা পরিমাণের সাথে মিল করে।
শোষণ অনুযায়ী, দ্রবণ নমুনার ঘনত্ব বিল ল্যামবার্ট আইন থেকে নির্ধারণ করা যেতে পারে, যা দেখায় যে শোষণ এবং নমুনার ঘনত্বের মধ্যে একটি লিনিয়ার সম্পর্ক রয়েছে। বিয়ার ল্যামবার্ট আইন অনুসারে, শোষণ হ'ল শোষণের সহগের পণ্য, যা প্রদত্ত তরঙ্গদৈর্ঘ্যের দ্রাবক দ্বারা আলোকে পরিমাণমতো গ্রহণ করে এবং আলো যে দূরত্ব দিয়ে যায় of নমুনা, বা ভ্রমণের দূরত্ব এবং দ্রবণীয় ঘনত্ব। সাধারণভাবে, শোষণ পরিমাপের লক্ষ্য হ'ল নমুনার ঘনত্ব পরিমাপ করা।
স্পেকট্রফোটোমিটারের উপাদান
প্রতিটি স্পেকট্রফোটোমিটারে একটি আলোক উত্স, একটি কলিমেটার (লেন্স বা দৃ strong় এবং সোজা মরীচি প্রেরণের জন্য ফোকাসিং ডিভাইস), বিভিন্ন তরঙ্গদৈর্ঘ্যের বিমগুলি পৃথক করার জন্য একরঙা, এবং পছন্দসই তরঙ্গদৈর্ঘ্যের তরঙ্গ বা খাঁজ নির্বাচন করার জন্য একটি দৈর্ঘ্য নির্বাচক থাকে। এই ভিডিওতে উপস্থাপিত স্পেকট্রফোটোমিটারে ব্যবহৃত আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য অতিবেগুনী এবং দৃশ্যমান আলোর মধ্যে রয়েছে। স্পেকট্রোফোটোমিটারে একটি নমুনা ধারক, একটি ফটোডেক্টর এবং সনাক্তকারীটির ফলাফল প্রদর্শনকারী একটি স্ক্রিনও অন্তর্ভুক্ত থাকে।
সর্বাধিক সাম্প্রতিক স্পেকট্রোফোটোমিটারটি সরাসরি কম্পিউটারে মিলিত হয়, যেখানে পরীক্ষামূলক পরামিতিগুলি নিয়ন্ত্রণ করা যায় এবং ফলাফলগুলি প্রদর্শিত হয়।
স্পেকট্রফোটোমিটারের কার্যকারী নীতি
স্পেকট্রফোটোমেট্রি চালানোর সময়, আপনি যে ধরনের জৈবিক বা রাসায়নিক সমাধান ব্যবহার করেন তার উপর নির্ভর করে গ্লোভস পরার মতো যথাযথ সতর্কতা অবলম্বন করা জরুরী।
ডিভাইসটি চালু করুন এবং নমুনার ইউভি-ভিস বর্ণালী পরিমাপ করার আগে প্রদীপ এবং ইলেকট্রনিক্সগুলিকে উত্তপ্ত হতে দিন।
একই পিএইচ এবং অনুরূপ আয়নিক শক্তি দিয়ে একই সমাধানের একটি ফাঁকা নমুনা প্রস্তুত করুন, তবে উপাদানগুলি বিশ্লেষণ করা ছাড়াই; যেহেতু কিউভেট এবং দ্রাবক আলো ছড়িয়ে দিতে পারে, তাই এটি নমুনা বিশ্লেষণ করা প্রয়োজন।
Traditionalতিহ্যবাহী স্পেকট্রোফোটোমিটার নমুনা ধারক প্লাস্টিক এবং কোয়ার্টজ বাটি ধরে রাখতে ডিজাইন করা হয়েছে। একটি বাটি মধ্যে মূল সমাধান পিপেট।
কোনও আঙুলের ছাপ মুছা এবং বাটির বাইরের দিকে স্প্ল্যাশ করার পরে, নমুনা ধারকটির মধ্যে কুয়েটটি সঠিকভাবে sertোকান এবং idাকনা দরজাটি বন্ধ করুন।
দরজাটি কখনও বন্ধ করতে ভুলবেন না কারণ একটি খোলা বর্ণালী থেকে ইউভি বিকিরণ আপনার চোখ এবং ত্বকের ক্ষতি করতে পারে।
নমুনায় স্থানান্তরিত হবে এমন কাঙ্ক্ষিত তরঙ্গদৈর্ঘ্য বা তরঙ্গদৈর্ঘ্য পরিসীমা প্রোগ্রাম করুন। এটি নির্ভর করে যে উপাদানটি বিশ্লেষণ করা হচ্ছে সেই তরঙ্গ দৈর্ঘ্যের উপর নির্ভর করে। যন্ত্রটি ফাঁকা নমুনা পরিমাপ করে শূন্য করা হয়, যা নমুনা বাফারের কারণে নীচের শোষণকে বিয়োগ করে।
আপনি যে ধরণের স্পেকট্রফোটোমেট্রি পরীক্ষা করছেন তার উপর নির্ভর করে, নমুনা পরিমাপের আগে একটি স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখা তৈরি করা প্রয়োজন হতে পারে, যেখান থেকে নমুনায় বিশ্লেষণ করা যৌগের ঘনত্ব নির্ধারণ করা যেতে পারে।
বুদবুদ প্রবর্তন এড়ানোর জন্য নমুনাটিকে সঠিক তাপমাত্রায় পৌঁছাতে এবং আলতো করে মেশান। নমুনাটি সরাসরি মেশিনের অভ্যন্তরে বাটিতে যোগ করা যায় এবং একটি পঠন তৈরি করা যায়।
নমুনা শোষণের জন্য পরিমাপ করার পরে, পরীক্ষাটি সঠিকভাবে গণনা করা হয়; উদাহরণস্বরূপ, ঘনত্ব বা এনজাইম ক্রিয়াকলাপ স্তর নির্ধারণ করতে।
স্পেকট্রোফোটোমিটার প্রয়োগ
স্পেকট্রফোটোমিটারের অন্যতম সাধারণ ব্যবহার হ'ল সেল ঘনত্ব পরিমাপ করা। কোষের ঘনত্ব পরিমাপ ব্যাকটিরিয়ার লগারিদমিক বৃদ্ধির বক্ররেখা উত্পাদন করতে ব্যবহার করা যেতে পারে, যেখান থেকে রিকম্বিন্যান্ট প্রোটিনের সংহতকরণের জন্য অনুকূল সময় নির্ধারণ করা যেতে পারে।
রাসায়নিক বিক্রিয়া হারকে পরিমাপ করতে স্পেকট্রফোটোমিটারও ব্যবহার করা যেতে পারে। এই রূপটিতে, শোষণটি এনজাইম্যাটিক প্রতিক্রিয়ার নিরীক্ষণের জন্য ব্যবহৃত হয়, যা 452nm এর অন্তর্বর্তী প্রতিক্রিয়ার মাধ্যমে সময়ের সাথে অদৃশ্য হয়ে যায়। উপযুক্ত সমীকরণের সাথে ডেটা মেলাতে এই এনজাইমেটিক পদক্ষেপের হার গণনা করা যেতে পারে।
মাইক্রো স্পেকট্রোফোটোমিটারের পরিচিতি নমুনা ধারকের প্রয়োজনীয়তা দূর করে। এই বর্ণালোকগুলি নমুনা বজায় রাখার জন্য পৃষ্ঠের টান ব্যবহার করে।
প্রোটিন এবং নিউক্লিক অ্যাসিড সহ বায়োমোলিকুলের মতো ছোট এবং ব্যয়বহুল নমুনাগুলির ভর এবং ঘনত্বকে পরিমাপ করার জন্য মাইক্রোস্পেকট্রফোটোমিটার সেরা পছন্দ।
280nm এ প্রোটিনের শোষণ ট্রাইপটোফান, টাইরোসিন এবং ফেনিল্যানালাইনে পাওয়া সুগন্ধযুক্ত পার্শ্ব চেইনের সামগ্রীর উপর, পাশাপাশি দুটি সিস্টাইনের মধ্যে ডিসস্লফাইড বন্ধনের উপর নির্ভর করে।
প্রোটিনের ঘনত্বটি তার শোষণ দ্বারা 280nm এবং এর শোষণ সহগ দ্বারা নির্ধারণ করা যেতে পারে, যা অ্যামিনো অ্যাসিডগুলির সংমিশ্রণের উপর ভিত্তি করে।
ডিএনএ এবং আরএনএর সর্বাধিক শোষণ 260nm থাকে, যেখান থেকে তাদের ঘনত্ব নির্ধারণ করা যায়। নিউক্লিক অ্যাসিডের বিশুদ্ধতা এছাড়াও নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের শোষণের পাঠের অনুপাত থেকে মূল্যায়ন করা যেতে পারে।